|
Журнал «Биотехнология»
→
Архив номеров журнала
Архив за 2015 год
→
Номер 6
→
Оценка эффективности промоторов Corynebacterium glutamicum и их использование для усиления активности генов у лизин-продуцирующих бактерий
Оценка эффективности промоторов Corynebacterium glutamicum и их использование для усиления активности генов у лизин-продуцирующих бактерийАвтор: М.Г. Тарутина, Н.М. Раевская, Т.Е. Шустикова, Л.Е. Рябченко, А.С. Яненко Страница: 16-24
Оценка эффективности промоторов Corynebacterium glutamicum и их использование для усиления активности генов у лизин-продуцирующих бактерий Биотехнология, 2015, № 6, С. 16-24 УДК 577.4 Раздел: «Продуценты, биология, селекция, генетическая инженерия»
М.Г. Тарутина, Н.М. Раевская, Т.Е. Шустикова *, Л.Е. Рябченко, А.С. Яненко * ФГУП “Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов” (ГосНИИгенетика), Москва, 117545 e-mail: igenetic@yandex.ru, yanenko@genetika.ru
На основе репликативного вектора pNS2 и репортерного гена cat из транспозона Tn9, кодирующего хлорамфениколацетилтрансферазу, сконструирован вектор pNS-cat72 для клонирования промоторов разных генов и оценки их силы по устойчивости к хлорамфениколу в клетках штаммов Corynebacterium glutamicum. С помощью этого вектора изучена сила промоторов различных генов у штамма Corynebacterium glutamicum GEN1-2 (lysCA279T, S317A), содержащего аспартокиназу, устойчивую к ретроингибированию лизином и треонином. Обнаружено, что промоторы генов eftu, sod, cspB и leuC обеспечивают более высокий уровень устойчивости к хлорамфениколу, чем промоторы генов lysC, pyc, tkt, fbp, вовлеченных в контроль биосинтеза лизина. Показано, что замена собственного промотора гена ddh на промотор sod увеличивает уровень транскрипции почти в 10 раз, при этом активность фермента диаминопимелатдегидрогеназы усиливается в 3—4 раза, что приводит к увеличению продукции лизина клетками на 9%. Охарактеризованный набор промоторов разной силы является необходимым инструментом для оптимизации работы генов при конструировании штаммов-продуцентов клеточных метаболитов.
Ключевые слова: активность фермента, промоторы, синтез лизина, экспрессия гена, Corynebacterium glutamicum.
Полная версия данной статьи находится на сайте журнала «Биотехнология» по адресу: http://www.biotechnology-journal.ru/jour/article/view/105 и на сайте Российской научной электронной библиотеки по адресу: http://elibrary.ru/item.asp?id=25482113
23.09.2016, 4874 просмотра. |
Контакты
|