Журнал «Биотехнология» Архив номеров журнала Архив за 2015 год Номер 2 Исследование аэробного биосинтеза 4-гидроксимасляной кислоты клетками Escherichia coli при гетерологичной экспрессии гена 2-кетоглутарат-декарбоксилазы

Исследование аэробного биосинтеза 4-гидроксимасляной кислоты клетками Escherichia coli при гетерологичной экспрессии гена 2-кетоглутарат-декарбоксилазы

Автор: А.Ю. Гулевич, М.С. Сконечный, А.В. Сухоженко, А.Ю. Скороходова, В.Г. Дебабов

Страница: 46-54

 

Исследование аэробного биосинтеза 4-гидроксимасляной кислоты клетками Escherichia coli при гетерологичной экспрессии гена 2-кетоглутарат-декарбоксилазы

Биотехнология, 2015, № 2, С. 46-54

УДК 577.121

Раздел:  «Продуценты, биология, селекция, генетическая инженерия»

 

А.Ю. Гулевич 1, *,  М.С. Сконечный 2,  А.В. Сухоженко 1,  А.Ю. Скороходова 1,  В.Г. Дебабов 1

1  ФГУП “Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов” (ГосНИИгенетика),  Москва, 117545

2  ФГАОУ высшего образования “Российский университет дружбы народов”,  Москва, 117198

e-mail:  gulevich@genetika.ru

 

Ген Rv1248c (kgd) Mycobacterium tuberculosis был экспрессирован в рекомбинантном штамме E. coli с инактивированными путями смешаннокислотного брожения и анаэробной генерации ацетил-КоА, а также с модифицированной системой транспорта и фосфорилирования глюкозы и измененной регуляцией гена ydfG, кодирующего NADPH-зависимую дегидрогеназу гидроксикарбоновых кислот. Установлено, что при интенсивном формировании 2-кетоглутарата в ходе аэробной утилизации глюкозы синтез 4-гидроксимасляной кислоты рекомбинантным штаммом E. coli возможен не только при прямой конверсии 2-кетоглутарата в сукцинат-полуальдегид под действием чужеродной ферментативной активности, но и в результате вовлечения соответствующего интермедиата цикла трикарбоновых кислот в каскад нативных биохимических реакций. Индуцированная экспрессия гена 2-кетоглутарат-декарбоксилазы в клетках рекомбинантного штамма обеспечивала эффективную конверсию 2-кетоглутарата в производные сукцинат-полуальдегида; при этом концентрация синтезированной 4-гидроксимасляной кислоты достигала 0,3 мМ и лимитировалась, по-видимому, активностью фермента, катализирующего терминальную стадию восстановления предшественника.

 

Ключевые слова:  4-гидроксимасляная кислота,  2-кетоглутарат-декарбоксилаза,  Escherichia coli.

 

Полная версия данной статьи находится на сайте Российской научной электронной библиотеки по адресу:  http://elibrary.ru/item.asp?id=23746040

 

14.09.2015, 4788 просмотров.

Контакты

Адрес: 123182 Россия, Москва
Площадь Академика Курчатова д. 1
Тел.: +7 (499) 196-73-52


E-mail: biotechjournal@nrcki.ru