Метод флуоресцентного мониторинга жизнеспособности клеточных моделей кожи в условиях микробиореактора

Автор: Е.В. Трушкин, И.А. Сергачев, Н.П. Петрова, В.А. Петров, А.Ю. Шкурников, У. Маркс, Н.Г. Лузгина, Д.А. Сахаров

Страница: 91-96

Метод флуоресцентного мониторинга жизнеспособности клеточных моделей кожи в условиях микробиореактора

Биотехнология, 2013, № 1, С. 91–96

УДК 57.04, 57.041, 57.032

Раздел: «Метрология, стандартизация, контроль»

Е.В. Трушкин^1,*, И.А. Сергачев¹, Н.П. Петрова¹, В.А. Петров², А.Ю. Шкурников¹, У. Маркс³, Н.Г. Лузгина⁴, Д.А. Сахаров¹

¹ ООО НТЦ «БиоКлиникум», Москва, 115088

² ФГБУ "Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии РАМН", Москва, 125315

³ Technische Universitt Berlin, Berlin, 10623

⁴ ФГБУ «Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН», Новосибирск, 630117 

e-mail: e.trushkin@bioclinicum.com

В работе предложен неинвазивный метод оценки количества живых клеток системы, моделирующей человеческую кожу, в условиях микробиореактора с помощью флуоресцентных красителей, использующий для детекции систему с оптическим световодом. Показана эффективность разработанной системы на различных клеточных моделях кожи (дерма, эпидермис или их смешанные культуры). Применение флуоресцентного красителя позволило проводить неинвазивные измерения в течение двух недель. Данные по числу живых клеток, полученные прямым подсчетом и с использованием предложенного метода, совпали в пределах ошибки измерения.

Ключевые слова: клеточные модели кожи, лазерная спектрофотометрия, микробиореактор, HaCaT.

A Method for Fluorescence Monitoring of Vital Human Skin Cell Models during Cultivation in Microbioreactor

E.V. Trushkin^1,*, I.A. Sergachov¹, N.P. Petrova¹, V.A. Petrov², A.Yu. Shkurnikov, U. Marx³, N.G. Luzgina⁴, and D.A. Sakharov¹

¹ The Research and Technical Center BioClinicum, 115088, Moscow Russia

² The Research Center for General Pathology and Pathophysiology, Russ. Acad. Med. Sci., 125315, Moscow Russia

³ Technische Universitt Berlin, 10623, Berlin Germany

⁴ The Scientific Center for Clinical and Experimental Medicine, 630117, Novosibirsk Russia

e-mail: e.trushkin@bioclinicum.com

A noninvasive method using a fluorescent dye and an optical light guide system for the assessment of vital cell number in a human skin-modeling cell culture under the conditions of microbioreactor has been suggested. It was shown that the system is efficient in growing of various skin models (derma, epidermis or their mixed cultures). The used dye permitted to perform noninvasive measurements during two weeks. The data on the number of vital cells obtained by direct counting and the suggested method were similar within the error range.

Key words:  HaCaT, laser spectrometry, microbioreactor, skin cell models.

14.06.2013, 3792 просмотра.